Obsah
Štúdie s mikrobiálnymi kultúrami často vyžadujú identifikáciu organizmov v nich prítomných. Keď sa malá časť kultúry vloží na agar obsahujúci živné médium, je možné rozdeliť množstvo baktérií na jednotlivé jednotky tvoriace kolónie. Každá z týchto jednotiek sa vyvíja v samostatných kolóniách, ktoré vykazujú vlastnosti, ktoré pomáhajú pri identifikácii organizmu.
Účel
Mikrobiologické štúdie si vyžadujú štúdium morfológie konkrétnych organizmov. V niektorých prípadoch musia byť organizmy prítomné v zmiešanej kultúre pred analýzou oddelené. Preto je dôležité izolovať tieto mikrobiálne kolónie. Bakteriálne kultúry obsahujú veľké množstvo buniek v jednej kvapke. Výsev depléciou na agarovej platni ich zriedi, takže sa jedna bakteriálna bunka usadí v špecifickej oblasti platne. Niekoľko z týchto samostatných buniek je od seba vzdialených niekoľko milimetrov. Každá z nich sa rozdelí a vytvorí tisíce nových buniek, z ktorých vzniknú izolované kolónie.
Princíp
Agarová platňa poskytuje médium bohaté na živiny, ktoré stimuluje rast a množenie mikroorganizmov. Na očistenie odpadových vôd sa používa metóda kvadrantového pruhovania, pri ktorej je celá platňa rozdelená do štyroch kvadrantov. Pri prechode z jedného kvadrantu do druhého dochádza k postupnému riedeniu pôvodnej kultúry po celej dostupnej ploche. Kvadrant, v ktorom začínate, vykazuje hustý a nevýrazný mikrobiálny rast, ktorý vyzerá ako koberec mikroorganizmov, zatiaľ čo posledný zobrazuje izolované kolónie.
Materiály
Naočkovanie výfukových plynov vyžaduje platne s živným agarom, slučku na očkovanie, kultiváciu baktérií, dezinfekčný roztok, ako je napríklad Lysol 10%, a Bunsenov horák. Budete tiež potrebovať bezpečnostné vybavenie, ako je zástera, rukavice a ochranné okuliare. Inokulum na tvorbu strií sa vyrába z kultúry baktérií pomocou slučky a poškriabania platní s živným agarom. Bunsenov horák slúži na horenie rukoväte počas drážok. Pred začatím experimentu použite dezinfekčný roztok na čistenie povrchu.
Metóda
Na zasiatie do prvého kvadrantu pohybom tam a späť použite malé množstvo očkovacej látky. Rúčku zahoďte za plameň a nechajte ju vychladnúť. Dotknite sa jej časťou agarovej platne, ktorá nebola naočkovaná. Dotknite sa ho jedným koncom oblasti, ktorú ste práve zasiali, a odtiaľ ho roztiahnite do druhého kvadrantu. Smyčku znova plameňom a ochladením a z druhej oblasti spracujte tretí kvadrant. Rovnaký postup opakujte so štvrtým kvadrantom.
